ニパウイルスポリメラーゼのクライオEM構造とハイスループットRdRpアッセイの開発は抗NiV創薬を可能にする

概要

本研究は、株をまたいだNiV L-Pポリメラーゼ複合体の構造的特徴を解明し、バックプライミング活性を明らかにした。さらに、高感度かつハイスループットなポリメラーゼアッセイを整備し、ヘニパウイルスに対する直接作用型抗ウイルス薬のスクリーニングを加速させる基盤を提供した。

主要発見

• マレーシア株およびバングラデシュ株由来の全長・切断型NiVポリメラーゼの複数クライオEM構造を解明した。
• L蛋白PRNTaseドメイン内の2つの保存ループと、RdRp-PRNTaseとCDドメイン間相互作用を同定した。
• 高感度な放射性標識RNA合成アッセイによりNiVポリメラーゼのバックプライミング活性を見出した。
• 蛍光・発光ベースの非放射性ポリメラーゼアッセイを開発し、L阻害薬のハイスループットスクリーニングに適用可能とした。

臨床的意義

前臨床段階ではあるが、これらのアッセイと構造知見によりポリメラーゼ阻害薬の合理的なスクリーニングと最適化が可能となり、将来のin vivoおよび臨床研究への候補選定を加速し得る。

限界

• 知見はin vitroの構造・生化学系に限定され、in vivoでの妥当性検証がない。
• 特定の抗ウイルス化合物の細胞・動物モデルでの有効性データは示されていない。

今後の方向性

ライブラリのハイスループットスクリーニングへの適用、創薬化学的最適化、ヘニパウイルス感染に対するin vivo有効性・毒性評価へと進めるべきである。